Title Međudjelovanje stanica urođene imunosti, enzima matrix metaloproteinaze-9 i proteina toplinskog šoka 70 u aterosklerotskoj bolesti karotidnih arterija : doktorski rad Title (english) Interactions between the cells of innate immunity, the enzyme of matrix metalloproterinase-9 and heat shock protein 70 in atherosclerotis of carotid arteries Author Zdrinko Brekalo Mentor Ines Mrakovčić-Šutić (mentor)Mentor Miljenko Kovačević (komentor)Committee member Miljenko Kovačević (predsjednik povjerenstva)Committee member Ines Mrakovčić-Šutić (član povjerenstva)Granter University of Rijeka Defense date and country 2012-01-01, Croatia Scientific / art field, BIOMEDICINE AND HEALTHCARE Universal decimal classificationUDC ) 616 - Pathology. Clinical medicine Abstract Cilj istraživanja: Čimbenici koji dovode do patogeneze ateroskleroze, kao i ostalih kardiogenih bolesti, predstavljaju vodeći uzrok pobola i smrtnosti u svim razvijenim, kao i zemljama u razvoju, te su predmet ispitivanja brojnih grupa istraživača različitih usmjerenja, a s istim ciljem: bolje razumijevanje bolesti, kao i čimbenike rizika, te rano prepoznavanje i liječenjes posljedičnom boljom prognozom, smanjenjem komplikacija, većom kvalitetom života i boljim zdravljem populacije u cjelini. Patogenetsku sliku ateroskleroze možemo pratiti kroz upalne, imunološke i metaboličke promjene. Cilj ovog istraživanja bio je ispitati međudjelovanja enzima matriks metaloproteinaze-9, proteina toplinskog šoka 70 i imunološkog statusa u bolesnika s razvijenom aterosklerotskom bolešću karotidnih arterija. Ispitanici i metode: Ispitanici su bili odabrani iz stratificiranog uzorka populacije odraslih bolesnika oba spola koji su se kontrolirali ili liječili na Odjelu za torakovaskularnu kirurgiju KBC-a Rijeka. U ispitivanju su bili razvrstani u tri skupine (bolesnici sa simptomatskom bolešću karotidnih arterija, asimptomatski bolesnici u kojih je neophodan operativni zahvat, te dobrovoljni davatelji krvi kao zdrava kontrola-samo za parametre koji su se istraživali iz periferne krvi i uzoraka urina).Procjenu imunološkog statusa vršili smo protočnom citometrijom i određivali fenotipsku pripadnost mononuklearnih stanica periferne krvi, te unutarstaničnim bojanjem određivali izražaj citolitičke molekule perforina. Metodom enzimskog imunoeseja (ELISA) određivali smo izražaj enzima matriks metaloproteinaze-9 (MMP-9). You created this PDF from an application that is not licensed to print to novaPDF printer (http://www.novapdf.com) VImunohistokemijski smo odredili izražaj proteina toplinskog šoka 70 (hsp 70) na parafinskim rezovima aterosklerotski promijenjenih karotida. Statistički podaci su izračunati uz pomoć kompjuterskog programa Statistica 10.1. Grafički i tabelarni prikaz učinjen je koristeći Excel program. Rezultati: Koncentracija enzima matrix metaloproteinaze -9 (MMP-9) je statistički značajno povišena u perifernoj krvi bolesnika s aterosklerotskom promjenom karotidnih arterija.Izražajhsp 70 je veći u aterosklerozi karotida. Postotak stanica NKT (CD3+, CD56+) je statistički značajno povišen u perifernoj krvi bolesnika s aterosklerotskom promjenom karotidnih arterija Postotak je statistički značajno viši u bolesnika s nestabilnim plakom, dok je postotak T regulacijskih stanica (Tregs:CD4+CD25+FoxP3+) u perifernoj krvi bolesnika s aterosklerotskom promjenom karotidnih arterija statistički značajno niži u usporedbi s dobrovoljnim davateljima krvi. Postotak je statistički značajno viši u bolesnika s nestabilnim plakom, kao i bolesnika sa simptomima u usporedbi s asimptomatskim bolesnicima. Zaključak: Naši rezultati su pokazali veliki porast enzima MMP-9 u urinu bolesnika s aterosklerozom karotida, praćenog porastom NKT, ali smanjenjem Tregs, što može upućivati na autoimunu komponentu ateroskleroze. Daljnja istraživanjatrebala bi biti usmjerena nadefiniranjeprecizneulogerazličitihpodskupina Tregulacijskig stanicauaterosklerozi i pokušati odgovoriti na brojna pitanja u vezi molekularnih mehanizama odgovornih zaregulacijsku funkcija u nastanku ateroskleroze, što bi moglo dovesti do razvoja Tregs specifičnih za prepoznavanje antigenskog plaka, potičući tako specifičnu, ali i lokalnu imunološku supresiju, s ciljem reduciranja razvoja plaka i komplikacija bolesti, te razvoja adekvatnijeg liječenja
Abstract (english) Aim:Factors that lead to thepathogenesisof atherosclerosisandother cardiovascular diseasesrepresent the key causeof morbidityandmortalityinall developedanddeveloping countries, andare the subjectof numerousresearch groupstestingdifferentorientations, with the same goal: a betterunderstanding of the disease, as well as risk factorsrisk andearly detectionand treatment, leading to betterprognosis, reducingcomplications andhigher qualityof life, as well as, betterhealthof the whole population. Pathogenesis ofatherosclerosis includes inflammatory, immune andmetabolic changes. The aimof this studywas to investigate theinteraction ofthe enzymematrixmetalloproteinase-9, heat shock protein70 andimmunestatus inpatientswith advancedatheroscleroticdisease of carotid arteries.Patients and methods: Patients wereselected from astratifiedsampleof the populationof adultpatients of bothsexes thatwerecontrolledortreatedat the Department of Cardiovascullar Surgery of Clinical Hospital Center Rijeka. Patients were classified intothree groups(patientswith symptomaticcarotidarterydisease, asymptomaticpatientsin whomsurgeryis necessary, and blood donorsas healthycontrols, onlytheparameters thatwerestudiedinperipheralblood andurine samples). We performedflow cytometry to determine thephenotypic profile of peripheralbloodmononuclearcells, and intracellularstaining to determine theexpression of thecytolyticmoleculeperforin. We determinedthe expression ofthe enzymematrixmetalloproteinase-9 (MMP-9) by The methodof enzymeimmunoassay(ELISA), Immunohistochemistry, we determinedthe expression ofheat shock protein70 (HSP 70)on paraffin sections ofatheroscleroticcarotidarteries. Statistical datawere calculatedusingthe computer programStatistica10.1.Graphical andtabular presentationwas madeusingExcelsoftware. Results:The concentrationof the enzymematrixmetalloproteinase-9(MMP-9) was significantlyelevatedin the peripheralbloodof patientswithatheroscleroticchange incarotidarteries. Expression ofHSP70wasgreater incarotidatherosclerosis. The percentage of NKT cells(CD3 +,CD56+)was significantly elevatedin the peripheralbloodof patientswithatheroscleroticchanges of carotidartery; percentagewas significantlyhigher inpatientswith unstableplaque, while thepercentage ofTregulatorycells(Tregs: CD4+CD25+Foxp3+)in peripheralblood ofpatientswithatheroscleroticchanges weresignificantlylowercomparedwithblood donors. The percentagewas significantlyhigher inpatientswith unstableplaque, andpatientswith symptomscomparedwithpatientswithout symptoms. Conclusion:Our resultsshoweda large increase inthe enzymeMMP-9 in theurine ofpatientswithcarotidatherosclerosis, accompanied byincreasedNKT, butby reducingTregs, which may indicatean autoimmunecomponentof atherosclerosis. Furtherresearch shouldbe aimed atdefining thepreciserolesof differentsubgroups of regulatory Tcellsin atherosclerosisandtry to answer on many questionsregardingthe molecularmechanisms responsibleforregulatoryfunctionsin the developmentof atherosclerosis, which could leadto the development ofTregsspecificfor theantigenrecognitionplaque, thus encouragingspecific andlocalimmunesuppression, aimed atreducingplaquedevelopmentandcomplications ofthe diseaseandthe development ofmore adequate treatment.
Keywords
aterosleroza
imunološki status
karotidne arterije
matriks metaloproteinaza-9
protein toplinskog stresa 70
regulacijske stanice T.
Keywords (english)
atherosclerosis
carotid arteries
heat shock protein 70
immunological status
matrix metalloproteinase-9
regulatory T cells.
Language croatian URN:NBN urn:nbn:hr:188:327441 Promotion 2012 Study programme Title: Biomedicine Postgraduate (doctoral) study programme Catalog URL https://libraries.uniri.hr/cgi-bin/ucat/unilib.cgi?form=D1130104034 Type of resource Text Extent 161 str; 30 cm File origin Born digital Access conditions Closed access Terms of use Created on 2017-01-19 19:07:17
